Anasayfa
|
Forum
|
Bilimler
|
Arşiv Tarama
|
GenKalem
|
Destek
|
Site Haritası
|
Linkler
|
RSS
|
Reklam
|
Arkadaşını Davet Et
|
İletişim
Anasayfa
Bilimler
Forum
Haberler
Sözlük
GenKampüs
Galeri
Kitaplar
e-dükk@n
Destek
İletişim
Anasayfa
Forum
Üye Ol
Şifre Hatırlat
_MYPMS_PROFILE_POPUP_ALERT
_MYPMS_POPUP_CNT
_INBOX
_MYPMS_CLOSE
GenForum - Bilimsel Forumlar - Türkiye Bilim Sitesi
|
Katagoriler
|
Genom Projesi
| Konu:
DNA İZOLASYONU
Sayfa: [
1
]
Aşağı git
« önceki
sonraki »
Gönderen
Konu: DNA İZOLASYONU (Okunma Sayısı 2398 defa)
0 Üye ve 0 Ziyaretçi konuyu incelemekte.
sedat yalçınkaya
Uzman Üye
Offline
Mesaj Sayısı: 141
DNA İZOLASYONU
«
:
14 Nisan 2006 - 21:41:44 »
en altta adresini ekleyeceğim akynakta DNA izolasyonunun nasıl yapıldığını buldum ve sizlerle paylaşmak istedim. söylediğim gibi benim yazdığım bir yazı değil, başka kaynaktan buldu veee işte o yazı :
Aşağıda yazdığım tekniklerden farklı teknikler de geliştirilmiş olup, benim bahsedeceğim yöntem bizim Hacettepe Üniversitesi Tıp Fakültesi, Tıbbi Biyoloji ABD laboratuarlarında kullandığımız yöntemdir. Her hakkı saklıdır. J
Biz DNA’yı izole etmek için ulaşılması en kolay olan kan dokuyu tercih ediyoruz. Eritrositler nükleuslarını kaybettiklerinden kullandığımız asıl hücreler lenfositlerdir.
Buyrun adım adım inceleyelim izolasyon basamaklarını;
1.Gelen kanda plazma ve hematokrit kısımları ayrılmışsa çalkalayarak birbirine tekrar karışmasını sağlıyoruz.
2.Bu kanı daha geniş ve derin bir deney tüpüne alıyoruz ve içine 45 ml. hizasına gelene kadar (bu rakamlar çok kati rakamlar olmayıp göz kararı da konabilir.) distile saf su ilave ediyoruz. Bu işlemi yapmamızın amacı, eritrositleri yarattığımız hipotonik ortamda hemolize uğratmak. Bu suyu ekledikten sonra bunları çalkalıyor ve 2500 RPM de 20 dakika kadar santrifüj ediyoruz.
3.Santrifüj işleminden sonra tüpün dibine baktığımızda tüpün bir kenarına yapışmış vaziyette beyazlık görebiliriz. Bu beyazlık lenfositler. Tüpün üst kısmındaki sıvıyı boşaltıyoruz lenfositleri yapıştığı yerden kaldırmadan..
4.Bu lenfosit tabakasının üzerine yeniden distile su ekliyor ve Vartox* ediyoruz. Çalkalanan lenfositler zaten yapıştığı yerden kalkıyor distile su içinde ve biz bu sıvıyı yeniden 2500 RPM’de 20 dakika kadar santrifüj ediyoruz.
5.Tekrar üst kısmını döküyoruz. Daha sonra elimizdeki bu tüpün içine 3 ml. Nuclei Lisis Buffer ekliyoruz.
6.Daha sonra 150 microlitre de Proteinase K solüsyonu ekliyoruz.
7.Proteinase K dan sonra 200 microlitre de SDS Buffer eklediğimiz içinde lenfositler bulunan tüpü 1 gece ortalama 37 santigrat derede bekletiyoruz.
8.Ertesi gün perişan olmuş halde elimize geçen tüpün içine sanki koyduklarımız yetmiyormuş gibi 1ml. De amonyum asetat ekliyoruz ve Vartox ediyoruz tekrar.
9.20 dakika da oda ısısında beklettikten sonra 5000 RPM’de 20 dakika santrifüj ediyoruz.
10.Bu defa da tüpün üst kısmını başka bir tüpe aktarıp, geri kalanını atıyoruz tıbbi atık kutumuzaaa.
11.Elimizdeki çözeltinin tüpte uzunlamasına gösterdiği değerin yaklaşık 2 katı kadar alkol ekliyoruz.
12.Ve inanılmaz duygu. DNA tüpün içinde toplanmaya başlıyor ve siz de çıplak gözle görebiliyorsunuz. Ben ilk gördüğümde gözlerim bile doldu vallahi J.
13.Neyyyysee bu kocaman DNA topluluğunu 400 microlitre Te-Buffer içine atıyoruz ve nam-ı diğer deoksiribonükleik asitimizi kaldırıyoruz!!!
*Vartox bizim Hacettepe’de kullandığımız ve tüpleri hızla çalkalayan ve hiç de kompleks olmayan bir gereç.
KAYNAK:
http://www.bilimfeneri.gen.tr/phpBB2/viewtopic.php?t=2609&sid=d221009f3c0b0484b5d81310c4d7204f
Logged
Kişinin bilmediği ya da hiçbir şekilde fikrinin olmadığı düşünceler gece kafasının labirentlerinde dolaşır.-Goethe
mehmet ŞAHİN
Uzman Üye
Offline
Mesaj Sayısı: 145
Ynt: DNA İZOLASYONU
«
Yanıtla #1 :
14 Nisan 2006 - 22:17:43 »
gözle nasıl görülebiliyor?fotoğrafları olsa daha iyi olurdu. deneyi evde yapmak için hazırlıklara başladım.tek bulmam gereken 150 microlitre de Proteinase K solüsyonu . vartox işini çay kaşığıyla halledeceğiz artık.
Logged
sedat yalçınkaya
Uzman Üye
Offline
Mesaj Sayısı: 141
Ynt: DNA İZOLASYONU
«
Yanıtla #2 :
14 Nisan 2006 - 22:23:15 »
aslında ben bu deneyi okulda yapmıştım ama burada anlatılan yöntemlerdeki gibi değildi. daha farklı amlzemeler kullanılıyordu ve kendim bir DNA görüntüleme cihazı yapmıştım. ne günlerdi ama...
Logged
Kişinin bilmediği ya da hiçbir şekilde fikrinin olmadığı düşünceler gece kafasının labirentlerinde dolaşır.-Goethe
mehmet ŞAHİN
Uzman Üye
Offline
Mesaj Sayısı: 145
Ynt: DNA İZOLASYONU
«
Yanıtla #3 :
14 Nisan 2006 - 22:25:08 »
bende bir yöntem buldum.(hir bir hakkı saklı değil)
MİKROORGANİZMA DNA İZOLASYON PROTOKOLÜ
DZ DNA Isolasyon Kiti ( Mikroorganizma için)
( Sol A ,Sol B , Sol C , Sol D ve Sol E)
Sürüntüden DNA izolasyonu:
Sürüntü pamuk uçlu eküvyon ile alınmış ise;
1,5 ml ependorf tüp içine 500 µl solüsyon B koyulur. Eküvyonun örnek alınmış ucu ependorf içine daldırılır ve 10 dakika bekletilir. Eküvyon alınır. İçine 10µl Sol A eklenir. 2. adımdan prosedüre devam edilir.
Serumdan DNA izolasyonu;
1. 1,5 ml’lik ependorf tüp içine 10 µl Sol A , üzerine 250 µl hasta serumu ve 500 µl Sol B koyulur.
2. Tüp, solüsyonların karışması için alt – üst edilir ve enzimin aktif ısısı olan 42˚C de 1 saat inkübe edilir.
3. İnkübasyondan sonra tüpe 500 µl Sol C ( İki fazlıdır. Alt fazdan alınmalıdır.) koyulur.
4. Vortekslenir (Süt kıvamında bir sıvı oluşacaktır.)ve 10.000 rpm’de 5 dk santrifüj edilir.
5. Santrifüjden sonra tüpte 2 faz oluştuğu görülür. Berrak olan üst kısım temiz bir ependorfa alınarak, üzerine 500 µl sol D koyulur ve hafifçe vortekslenir.
6. Sonra 10.000 rpm de 10 dk santrifüj edilir.
7. Süpernatant atılır ve üzerine 500 µl Sol E koyulur.
8. 10.000 rpm de 5 dk santrifüj edilir.
9. Süpernatant atılır. Tüpler 37 ˚C etüve koyularak alkol uçurulur.
10.5 dk sonra 50 µl distile su ile sulandırılır ve bakteri DNA’sı elde edilmiştir.
Logged
sedat yalçınkaya
Uzman Üye
Offline
Mesaj Sayısı: 141
Ynt: DNA İZOLASYONU
«
Yanıtla #4 :
14 Nisan 2006 - 22:29:48 »
Alıntı sahibi: sedat yalçınkaya üzerinde 14 Nisan 2006 - 22:23:15
aslında ben bu deneyi okulda yapmıştım
ama burada anlatılan yöntemlerdeki gibi değildi. daha farklı amlzemeler kullanılıyordu
ve kendim bir DNA görüntüleme cihazı yapmıştım. ne günlerdi ama...
şimdi tekrar okuduğumda deneyi aynen böyle yaptığımız aklıma geldi. bu yüzden pardon.
Logged
Kişinin bilmediği ya da hiçbir şekilde fikrinin olmadığı düşünceler gece kafasının labirentlerinde dolaşır.-Goethe
müge kayhan
Uzman Üye
Offline
Mesaj Sayısı: 104
Ynt: DNA İZOLASYONU
«
Yanıtla #5 :
30 Nisan 2008 - 21:51:59 »
bende çok meraklı olduğum için geçen sene gazi üniversitesinde bir biyolog ile dna izolasyonu yaptım öncelikle bana gerekli malzemeleri gösterdi nasıl yapacağım hakkında fikrim vardı ama tam olarak toparlayamıyordum elime bir kağıt tutuşturdu ve biryere gitti kağıtta dna izolasyonunu nasıl yapacağım yazıyordu biraz çekindim tek baıma büyük şeylere kalkmadım biraz hazırlandım ve o geldiğinde birlikte izole ettik hala heyecanlanıyorum anlatırken o anda ağladığımı kimseye söylemeyecektim ama söylemş olaym ağladm çünkü genetikle ilgli her adım engel olamadığım b genetik sevgimi artırıyo inanın daha fazlasını yapmak için sabırsızlıkla bekliyorum.
Logged
MÜGENETİK!hedefinize adım adım yaklaşın hedefi gözden kaçırdığınız anda engelleri görmeye başlarsınız.
liseli_gen_mühendisi_adayı genetik
Tecrübeli Üye
Offline
Mesaj Sayısı: 76
Ynt: DNA İZOLASYONU
«
Yanıtla #6 :
20 Mayıs 2008 - 10:19:15 »
merhaba,ben lise öğrencisiyim.ve gecen okul döneminde bilim teknikte gördüğüm bi deneyi uyguladım.Bu deneyin orjinal site adresini de veriyorum isteyen bakabilir.Ama bu deneyden sonra kırmızı küçük yapılar gördüm.Bunlar DNA MIYDI bilmiyorum ama öyle olması gerekiyormuş.Anlayamadığım şey,DNA gözle nasıl görülebiliyor?
http://www.funsci.com/fun3_en/dna/dna.htm
ayrıca herkes bu deneyi kolaylıkla yapabilir...çok zevkli bi deney...:)siteye bakmanızı isterm.:)
Saygılarımla,
Logged
Neden beni kimse anlamıyor ama herkes seviyor?..einstein
liseli_gen_mühendisi_adayı genetik
Tecrübeli Üye
Offline
Mesaj Sayısı: 76
Ynt: DNA İZOLASYONU
«
Yanıtla #7 :
20 Mayıs 2008 - 10:20:48 »
Sedat yalçınkaya,
DNA GÖRÜNTÜLEME CİHAZINI NASIL YAPMIŞTINIZ?AÇIKLARMISINIZ?MERAK ETTİM..
Logged
Neden beni kimse anlamıyor ama herkes seviyor?..einstein
neziha çetin
Uzman Üye
Offline
Mesaj Sayısı: 170
Ynt: DNA İZOLASYONU
«
Yanıtla #8 :
20 Mayıs 2008 - 14:27:20 »
Alıntı sahibi: liseli_gen_mühendisi_adayı genetik üzerinde 20 Mayıs 2008 - 10:19:15
merhaba,ben lise öğrencisiyim.ve gecen okul döneminde bilim teknikte gördüğüm bi deneyi uyguladım.Bu deneyin orjinal site adresini de veriyorum isteyen bakabilir.Ama bu deneyden sonra kırmızı küçük yapılar gördüm.Bunlar DNA MIYDI bilmiyorum ama öyle olması gerekiyormuş.Anlayamadığım şey,DNA gözle nasıl görülebiliyor?
http://www.funsci.com/fun3_en/dna/dna.htm
ayrıca herkes bu deneyi kolaylıkla yapabilir...çok zevkli bi deney...:)siteye bakmanızı isterm.:)
Saygılarımla,
BU SİTEDEKİ DENEYİ DENEMK İSTERİM DOĞRUSU ANCAK BU DENEYİ AÇIKLAYAN TÜRKÇE BİR SİTE YOKMU KOLAY GİBİ GÖRÜNÜYOR AMA ANLAMIYORUM İNGİLİZCESİNİ.RİCA ETSEM TÜRKÇE AÇIKLAMASINI GÖNDEREBİLİRMİSİN?
Logged
müge kayhan
Uzman Üye
Offline
Mesaj Sayısı: 104
Ynt: DNA İZOLASYONU
«
Yanıtla #9 :
20 Mayıs 2008 - 18:26:37 »
liseli gen mühendisi adayı!
bizim deney sonucunda gördüğümüz yapıların rengi şaffaftı siz boyamışmıydınız yoksa?
«
Son Düzenleme: 20 Mayıs 2008 - 18:28:32 Gönderen: müge kayhan
»
Logged
MÜGENETİK!hedefinize adım adım yaklaşın hedefi gözden kaçırdığınız anda engelleri görmeye başlarsınız.
liseli_gen_mühendisi_adayı genetik
Tecrübeli Üye
Offline
Mesaj Sayısı: 76
Ynt: DNA İZOLASYONU
«
Yanıtla #10 :
21 Mayıs 2008 - 15:51:11 »
Alıntı sahibi: neziha çetin üzerinde 20 Mayıs 2008 - 14:27:20
Alıntı sahibi: liseli_gen_mühendisi_adayı genetik üzerinde 20 Mayıs 2008 - 10:19:15
merhaba,ben lise öğrencisiyim.ve gecen okul döneminde bilim teknikte gördüğüm bi deneyi uyguladım.Bu deneyin orjinal site adresini de veriyorum isteyen bakabilir.Ama bu deneyden sonra kırmızı küçük yapılar gördüm.Bunlar DNA MIYDI bilmiyorum ama öyle olması gerekiyormuş.Anlayamadığım şey,DNA gözle nasıl görülebiliyor?
http://www.funsci.com/fun3_en/dna/dna.htm
ayrıca herkes bu deneyi kolaylıkla yapabilir...çok zevkli bi deney...:)siteye bakmanızı isterm.:)
Saygılarımla,
BU SİTEDEKİ DENEYİ DENEMK İSTERİM DOĞRUSU ANCAK BU DENEYİ AÇIKLAYAN TÜRKÇE BİR SİTE YOKMU KOLAY GİBİ GÖRÜNÜYOR AMA ANLAMIYORUM İNGİLİZCESİNİ.RİCA ETSEM TÜRKÇE AÇIKLAMASINI GÖNDEREBİLİRMİSİN?
BİLİM TEKNİK OCAK SAYISINDA AYRINTILI ANLATIYOR.BİLİM TEKNİK ALIYORSAN PROBLEM YOK.ALMIYOSAN adresim
craig_venter@windowslive.com
eklersin anlatırım...biraz uzun çünkü....
«
Son Düzenleme: 21 Mayıs 2008 - 15:58:33 Gönderen: liseli_gen_mühendisi_adayı genetik
»
Logged
Neden beni kimse anlamıyor ama herkes seviyor?..einstein
liseli_gen_mühendisi_adayı genetik
Tecrübeli Üye
Offline
Mesaj Sayısı: 76
Ynt: DNA İZOLASYONU
«
Yanıtla #11 :
21 Mayıs 2008 - 15:53:03 »
Alıntı sahibi: müge kayhan üzerinde 20 Mayıs 2008 - 18:26:37
liseli gen mühendisi adayı!
bizim deney sonucunda gördüğümüz yapıların rengi şaffaftı siz boyamışmıydınız yoksa?
yooo...ben hiç bi boyaa kullanmadım.ama ben muzun dnasını çıkarmıştım.siz farklı bişey yaptıysanız ondan olabilir belki...ama benimn nalayamadığım DNA nın gözle görünmesi ilginç değil mi?onlar çok küçük yapılar deil mi
Logged
Neden beni kimse anlamıyor ama herkes seviyor?..einstein
müge kayhan
Uzman Üye
Offline
Mesaj Sayısı: 104
Ynt: DNA İZOLASYONU
«
Yanıtla #12 :
22 Mayıs 2008 - 00:28:01 »
Alıntı sahibi: liseli_gen_mühendisi_adayı genetik üzerinde 21 Mayıs 2008 - 15:53:03
Alıntı sahibi: müge kayhan üzerinde 20 Mayıs 2008 - 18:26:37
liseli gen mühendisi adayı!
bizim deney sonucunda gördüğümüz yapıların rengi şaffaftı siz boyamışmıydınız yoksa?
yooo...ben hiç bi boyaa kullanmadım.ama ben muzun dnasını çıkarmıştım.siz farklı bişey yaptıysanız ondan olabilir belki...ama benimn nalayamadığım DNA nın gözle görünmesi ilginç değil mi?onlar çok küçük yapılar deil mi
kesinlikle öyleler bende bu soruyu yönelttiğimde gördüğümüz yapıların çok az bir oranda küçüldüğünü daha fazlasını yapamayacağımızı söylediler bana bende kivinin DNA sını çıkarmştm cnm şeffaftı gerçekten gözle görülmesi daha ayrntılı bilgi almadığın için sana abes gelmiştir canım belki ama söylediğim açıklamayı bizzat sorarak öğrendim:)
Logged
MÜGENETİK!hedefinize adım adım yaklaşın hedefi gözden kaçırdığınız anda engelleri görmeye başlarsınız.
Sayfa: [
1
]
Yukarı git
GenForum - Bilimsel Forumlar - Türkiye Bilim Sitesi
|
Katagoriler
|
Genom Projesi
| Konu:
DNA İZOLASYONU
« önceki
sonraki »
Gitmek istediğiniz yer:
Gitmek istediğiniz yer:
-----------------------------
Güncelleme ve Duyurular
-----------------------------
=> GenBilim v3
=> Forum Kuralları
-----------------------------
Danışma Kürsüsü
-----------------------------
=> Soru-Cevap
=> Yardım
=> Hata Rapor
-----------------------------
Katagoriler
-----------------------------
=> Ar-Ge Faaliyetleri
=> Beyin Göçü
=> Bilgisayar
=> Edebiyat
=> Evrim
=> Genom Projesi
=> İnternet
=> Kitap
=> Kültür & Sanat
=> Mizah
=> Mühendislik Bilimleri
=> Müzik
=> Spor
=> Türkçe Kullanımının Yaygınlaştırılması
=> Üniversitelerimiz
-----------------------------
Bilimler
-----------------------------
=> Arkeoloji
=> Bilişim
=> Biyoloji
=> Felsefe
=> Fizik
=> Fotoğraf
=> Genetik
=> Hukuk
=> İktisat
=> Jeoloji
=> Kimya
=> Matematik
=> Psikoloji
=> Sosyoloji
=> Tarih
=> Tıp
=> Diğer Bilimler
-----------------------------
Bilim Siteleri
-----------------------------
=> Bilimi Destekleyen Web Siteleri
-----------------------------
Öneri ve Şikayetler
-----------------------------
=> Türkiye Bilim Sitesi'nden beklentilerinizi tartışalım
=> Kategori Öner
-----------------------------
Diğer
-----------------------------
=> Serbest Forum
=> GenBilim.Com Şikayet Kutusu